长柄链格孢菌对熊果酸的生物转化工艺优化(2)
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参见附件。
2.7 生物转化工艺优化
2.71 单因素试验 单因素试验均以熊果酸的消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率为指标,进行不同孢子浓度、转化温度、底物加入量、转化时间、转速的单因素实验,考察了各因素对熊果酸消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷生成率的影响。
2.72 培养基正交试验 微生物培养基中包括碳源,氮源,pH,无机盐、生长因子等,这些因素的含量及配比都会对微生物的生长繁殖产生不同的影响。本正交试验主要从pH,K2HPO4,MgSO4,FeSO4 4个方面考察其对转化的影响。
发酵培养基的正交试验:采用L9(34)正交表进行发酵培养基的优化试验,每个处理重复3次,每瓶装入培养基60 mL,表中各水平含量为每瓶培养基中加入的量,见表1。
3 结果与分析
3.1熊果酸标准曲线的绘制
经测定熊果酸的回归方程为Y=2.18×106X-60 405(R2=0.999 6),线性范围0.2~1.2 g·L-1。
3.2 28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷标准曲线的绘制
28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的线性回归方程为Y=103×107X+38 558(R2=0.999 9),线性范围0.2~10 g·L-1。
3.3 转化产物的结构鉴定
转化产物:白色粉末,LibermannBurchard反应阳性,Molish反应阳性,糖水解衍生化后经气相分析有1个D型葡萄糖。ESIMS m/z 641 ......
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